I. Genetické minimum - chromozómové choroby a ich diagnostika
Ďurovčíková Darina
Klinika lekárskej genetiky SZU a FNsP, Bratislava
Úvod
Genetické choroby vznikajú v dôsledku mutácii na úrovni génu, alebo väčšej časti genómu, v interakcii s exogénnymi faktormi. Výskyt geneticky podmienených patologických stavov ( tab.1), alebo predispozícia k nim sa podľa viacerých štatistík odhaduje na 12-15% (1,2).
Etiologickú rôznorodosť spôsobujú rôzne typy genetických defektov, detekcia ktorých si vyžaduje špecifické laboratórne metódy (tab.1). V ostatnom čase sme zaznamenali ich významný pokrok, týkajúci sa najmä rozvoja genetických diagnostických testov, ktoré majú priamy dopad na manažment komplexnej starostlivosti o pacientov a rizikových členov rodiny. Pre včasnú diagnostiku a prevenciu genetických ochorení je dôležité vzdelávanie a transfer poznatkov do praxe každého lekára. Potrebe začlenenia najnovších poznatkov z medicínskeho výskumu a genetiky do pregraduálneho a postgraduálneho vzdelávania sú venované osobitné príspevky na blížiacej sa konferencii AMEE (Association of Medical Education in Europe). Forsíruje sa dostupnosť vedomostí s cieľom rozpoznať genotypo-fenotypové korelácie najmä vo vzťahu k liečbe a celkovej zdravotnej starostlivosti (3). Iné asociácie a spoločnosti (ESHG, OECD) odporúčajú vzdelávanie v uvedených oblastiach vrátane genomiky a proteomiky zaradiť aj do mimoprofesného vzdelávania pracovníkov v zdravotníctve ako aj pre širokú laickú verejnosť. Primeraná úroveň vzdelania zbavuje neopodstatnených obáv z genetiky, ktorá je v 21.storočí neoddeliteľnou súčasťou liečebno-preventívnej starostlivosti.
S potešením možno konštatovať, že uvedené odporúčania u nás viac rokov akceptujeme. Otázky genetického testovania, algoritmy genetickej diagnostiky, správnej laboratórnej praxe, etiky a legislatívy v odbore sú náplňou pravidelných školiacich aktivít na SZU.
Zároveň sú pre nás ambíciou zaplniť priestor v tomto periodiku na pokračovanie, ktorého obsahom bude minimum genetických poznatkov. Prvú časť venujeme chromozómovým ochoreniam a prehľadu ich diagnostických metód.
I. Chromozómové choroby
Chromozómové anomálie pozorujeme ako zmeny na chromozómoch , ktoré môžu byť :
- vrodené (konštitučné)
- získané (v priebehu života napr. malígnym procesom v bunke).
Vrodené chromozómové anomálie spôsobujú zmenou počtu, alebo štruktúry chromozómov génovú nerovnováhu a upozornia na seba závažnou poruchou morfogenézy. Pre autozómové anomálie je typický výskyt VVCH spolu s mentálnou retardáciou (obr.1). Anomálie pohlavných chromozómov sprevádzajú poruchy rastu a somatosexuálneho vývinu a sú z klinického hľadiska menej závažné. Vyhľadávanie ich zvýšeného rizika sa uskutočňuje celoplošným prenatálnym biochemický skríningom ( sAFP a betaHCG ) u tehotných žien v rozmedzí 16-18 týždňa gravidity. Vrodené a získané chromozómové anomálie potvrdíme cytogenetickým vyšetrením pri ktorom sa stanoví karyotyp. Výskyt chromozómových chýb v populácii živorodených je cca 1% (2.4).
Diagnostické známky na klinickej úrovni
Na chromozómové ochorenia u novorodenca upozorňuje prítomnosť vrodených vývinových chýb (VVCH) , ktoré sú zastúpené v ich etiológii cca 5%. Signálmi pre chromozómovú anomáliu bývajú nevysvetliteľná polystigmatizácia, tonusové poruchy, rôzne patologické parametre zistené prenatálnym ultrazvukovým vyšetrením plodu ako sú: mikrocefalia, zhrubnutá nuchálna riasa, rastová retardácia a rôzne orgánové anomálie a iné. Neskôr to býva mentálna retardácia, zaostávanie rastu, pubertálneho vývinu, nástupu menštruácie a iné. V dospelosti sa konštitučná chromozómová anomália diagnostikuje skôr výnimočne. Ich záchyt pozorujeme pri vyšetrení párov pre poruchy fertility a reprodukcie v podobe anomálií pohlavných chromozómov, zriedkavých foriem malých gonozómových mozaík a vyvážených chromozómových prestávb.
Charakteristika a rozdelenie
Predstavujú odchylky od normálnej chromozómovej výbavy somatickej bunky, ktorá obsahuje 22 párov autozómov (1-22 ) a pár pohlavných chromozómov – gonozómov (XX, alebo XY). Najčastejšou príčinou vzniku aneuploidie je nondisjukcia, alebo patologické rozdelenie chromozómov v meióze, ktoré vzniká prezygoticky. Zriedkavo sú dôsledkom postzygotickej poruchy mitotického bunkového delenia. Tieto javy sú väčšinou náhodné, aj keď sa pripúšťa, že určité rodiny môžu mať sklon k nondisjuncii (asynchrónne delenie pri predčasnom delení centroméry). Len istá malá časť chromozómových anomáli vzniká zákonite v dôsledku vyvážených anomálií (prestavieb chromozómov), ktoré sa vyskytujú v populácii ich zdravých prenášačov s frekvenciou menej ako 0,2% (4)
Rozdelenie podľa (I a II) zohľadňuje typy chromozómov a konkrétne zmeny.
I. Rozdelenie podľa typu chromozómov
A./ AUTOZÓMOVÉ
B./ GONOZÓMOVÉ
II. Podľa typu zmien v počte a štruktúre chromozómov:
a/ numerické - odchýlky od normálneho počtu diploidnej sady chromozómov somatickej bunky. Môže ísť nadpočetný chromozóm z páru ( trizómia ), chýbajúci ( monozómia ), dva nadpočetné chromozómy z páru ( tetrazómia ) , násobky sady chromozómov ( triploidie ) a iné odchylky od normálneho počtu (aneuploidie ). Z autozómových anomálií k nim patrí trizómia 21 - Downov syndróm. Ide o najčastejšiu chromozómovú anomáliu, ktorej výskyt populácii je od od 1:750-1000 živorodených. Medzi ďaľšie zvyčajne neonatálne letálne trizómie patria Patauov ( trizómia 13 ) a Edwardsov ( trizómia 18 ) syndróm.
Trizómia môže byť voľná, náhodná forma s nízkym rizikom rekurencie, alebo translokačná. Táto mohla vzniknúť ako mutácia de novo, alebo dôsledkom vyváženej translokácie jedného z rodičov. Z gonozómových anomálií má najčastejší výskyt monozómia X, alebo Turnerov ( karyotyp 45,X0 ) a Klinefelterov syndróm ( karyotyp 47,XXY), ktoré sa zisťujú v čistej, alebo mozaikovej forme. Výskyt vybraných chromozómových anomálií je v tabuľke č.2.
b/ štruktúrové - charakterizuje zmena štruktúry chromozómu vizualizovateľné ako prestavby krátkeho (p) a / alebo dlhého ramienka (q) chromozómu. Patria sem chýbanie určitého úseku chromozómu (delécia), alebo zmnoženie (duplikácia) istého úseku chromozómu. Ďalej sú to premiestnenie časti chromozómu na iný (translokácia), alebo iné tvarové zmeny chromozómov ( prstencový chromozóm, izochromozóm). Príkladom autozómovej štruktúrovej anomálie je syndróm mačacieho plaču (Cri-de-Chat sy ), ktorý spôsobuje delécia úseku krátkeho ramienka chromozómu č.5 (obr.2) Zjednodušený zápis karyotypu u chlapca s týmto syndrómom je 46,XY, 5p-. Z gonozómových anomálií sa pomerne často vyskytuje prstencový chromozóm X - karyotyp 45,X r(X), alebo izochromozóm, ktorý sa u ženy manifestuje ako Turnerov syndróm (5). Submikroskopické zmeny, kryptické translokácie nie sú možné touto metódou obsiahnúť.
c/ mozaiky: predstavujú prítomnosť viacerých bunkových klonov s rozdielnou chromozómovou výbavou. Pozorujeme ich v bunkách ako rôzne chromozómové línie, nezriedka ako minoritné, s frekvenciou menšou ako 10%. Na ich detekciu je potrebné zhodnotiť väčšie množstvo mitotických figúr. Časté sú napríklad mozaikové formy Turnerovho syndrómu, Klinefelterovho syndrómu. U týchto pacientov teda nájdeme v bunkách karyotyp s normálnym a patologickým chromozómovým nálezom. Zápis karyotypu obsahuje viacero línii a začína sa zvyčajne najpočetnejšie zastúpenou. Mozaika Turnerovho syndrómu môže mať aj takýto nezvyčajný karyotyp ( 45,XO/46,XX/46,XY ). V tomto prípade prevažuje línia s chýbajúcim X chromozóm, prítomná je aj normálna a minoritná s prítomnosťou Y chromozómu. Existujú aj iné varianty s prstencovým, alebo s izochromozómom.
Genetické diagnostické testy
Chromozómové anomálie najčastejšie diagnostikujeme laboratórnymi technikami, ktoré poskytujú kompletnú analýzu karyotypu. V ostatnom čase sa klasické metódy identifikácie chromozómov dopĺňajú o nové zobrazovacie metódy, ktorými sa odhaľujú predtým nepoznané prestavby na submikroskopickej úrovni (5,6).
Klasická metóda cytogenetického vyšetrenia je založená na analýze metafázových chromozómov získaných mitotickým delením kultivovaných lymfocytoch, ktoré sa farbia konvenčne a prúžkovacími metódami (C, G, R, Q). Detekuje numerické a štruktúrové anomálie na úrovni do 550 bandov. Vyššiu rozlišovaciu schopnosť dosiahneme metódou HRT (High resolution method), kde sa hodnotia dlhšie prometafázické chromozómy. Vyšetrenie karyotypu touto metódou vyžaduje odbornú skúsenosť a pre jej náročnosť ju nahrádzajú iné modernejšie metódy farebnej cytogenetiky (6).
Klasická cytogenetika sa rutinne využíva v diagnostike konštitučných chromozómových anomálií u pacientov s vrodenými vývinovými chybami (VVCH), mentálnou retardáciou ( MR ), poruchami rastu a pohlavného vývinu, alebo pri opakovaných spontánnych potratov. V neposlednej rade aj v prenatálnej diagnostike u plodu, ktorá sa uskutočňuje po stanovení ich rizika klinickým genetikom. Gonozómové anomálie, najmä v nizkopercentnej mozaikovej forme (Turnerov, Klinefelterov syndróm) sa môžu výnimočne diagnostikovať až pri poruchách reprodukcie v dospelom veku. Klasická metóda umožní záchyt štruktúrových anomálií a mnohonásobných chromozómových prestávb, ktoré sú typické pre syndrómy chromozómovej instability s rizikom malignity. Príkladom sú Fanconiho anémia, Ataxia teleangiektázia, Nijmegenský syndróm a iné. Manifestujú sa zvýšenou lomivosťou chromozómov. Najčastejšie sa pri týchto syndrómov zistí instabilná chromozómová translokácia 7/14, spolu s inými štruktúrovými zmenami a figúrami ( gapy, breaky, triradiály, kvadruradiály), ktoré bývajú v rôznom percentuálnom zastúpení (obr.3).
Fluorescenčná in situ hybridizácia ( FISH ) metóda používa metódy molekulovej cytogenetiky. Umožní diagnostiku chromozómových prestávb na submikroskopickej úrovni ( < 800 bandov ), ktoré nie sú vizualizovateľné klasickou technikou . Ide najmä o mikrodelečné a mikroduplikačné syndrómy a pomáha tiež odhaliť nízkopercentné mozaiky. Princípom je detekcia signálov po hybridizácii pacientovej chromozómovej DNA so špecifickými sondami (centromerickými, celochromozómovým, alebo lokusovo špecifickými) použitými podľa potreby (obr.4 ). Centromerické sondy sa používajú na zisťovanie numerických chromozómových chýb s dôkazom prítomnosti centromér, telomerických sekvencií a obsahu heterochromatínu. Celochromozómové sondy hybridizujú so svojim homológom pozdĺž celého chromozómu. Sú vhodné na diagnostiku štruktúrových anomálií chromozómov ako sú translokácie, delécie, inverzie. Lokusovo špecifické, alebo génové sondy hybridizujú do oblasti hľadaných konkrétnych sekvencii. Tento typ sond, veľkosti cca 150 kb, sa využíva k diagnostike mikrodelečných syndrómov ako sú napríklad najznámejšie z nich ( Praderov-Williho, Angelmanov, Di-Georgov, Wiliamsov-Beuerenov). Výhodou tejto metódy je hodnotenie signálov na väčšom počte chromozómov aj bunkových jadier. Použitie FISH a iných DNA metód detekujúcich sekvencie v oblasti SRY chromozómu Y umožňuje pri mozaikových formách Turnerovho syndrómu vyhľadávať pacientky s rizikom gonadoblastómu.
Kombinácia klasických a molekulovo cytogenetických metód sa využíva v onkogenetike pri diagnostike a liečbe hemoblastóz, vrátane monitorovania reziduálnej choroby a postransplantačných stavoch. Chronickú myeloickú leukémiu potvrdzuje výskyt chromozómu Philadelphia, ktorý vzniká v dôsledku translokácie medzi dlhými ramenami
Iné modifikované techniky
CGH - Komparatívna genómová hybridizácia je založená na porovnávaní dvoch fluorescenčne značených vzoriek DNA ( referenčnej a pacientovej), ktoré hybridizujú s normálnymi metafázovými chromozómami. Pacientová testovaná DNA je značená zeleným flurochrómom a referenčná vzorka ( DNA od zdravého jedinca s normálnym karyotypom ) sa označuje červeným. V pomere 1:1 sa obidve nechajú hybridizovať na preparáte s normálnymi chromozómami. Nerovnováhu v testovanej vzorke zistíme vyhodnotením pomeru intenzity zelenej a červenej fluorescencie pomocou špeciálneho softwaru. Využíva sa v nádorovej cytogenetike na skrínovanie chromozómovej nerovnováhy. Metóda však presnejšiu identifikáciu prestavby neumožňuje.
Multicolor FISH- mnohonásobná farebná fluorescentná in situ hybridizácia K detekcii zmien sa používa zmes rozdielne značených sond 5 fluorochrómami a ich vzájomnou kombináciou, čím sa docieli rozlíšenie všetkých chromozómov. Na vyhodnotenie je potrebná digitálna zobrazovacia mikroskopia s filtrami, CCD kamera a počítačový software k analýze obrazu. Na základe fluorochrómovej kompozície sa každému chromozómu určí tzv.pseudofarba..Táto metóda sa používa na identifikáciu zložitejších translokácií a prestavieb medzi viacerými chromozómami. Neumožňuje detekciu vnútrochromozómových zmien typu inverzií a malých delécií.
SKY - spektrálne karyotypovanie je variantom mnohofarebnej FISH, každému chromozómu je tiež pridelená pseudofarba. Kombinuje snímanie obrazu trojakým filtrom CCD kamerou s Fourierovou spektroskopiou a príslušným počítačovým programom.
mBAND - metóda mnohonásobného pruhovania - je založená na podobnom princípe ako FISH. Podstatou m.-pruhovania je označenie jedného chromozómu viacerými značenými sondami. V kombinácii sa tiež používa 5 fluorochrómov. Každá sonda hybridizuje s inou časťou chromozómu. Na základe hybridizačných signálov dochádza k tvorbe priečnych farebných pruhov po celej dĺžke chromozómu.
Záver: Zlatým štandardom klinickej cytogenetiky je vyšetrenie karyotypu klasickou metódou. S pribúdajúcimi dôkazmi o výskyte submikroskopických chromozómových zmien, kryptických prestávb modernými laboratórnymi technikami sa zvyšuje pravdepodobnosť odhaliť kauzálnu súvislosť s etiologicky neobjasnenou mentálnou retardáciou a polystigmatizáciou.
Literatúra:
1. Smith, C. J., Donnai , D.: Human malformation. In: Emery and Rimon´s Principles and Practice of Medical Genetics. 3.vyd. New-York: Churchill Livingstone, 1998, s. 687 - 696.
2. Thompson and Thompsonová : Genetics in medicine, W.B.Saunders company, 6-th Ed., 2001, s.443.
3. Internetové adresy: www.amee.org
4. VOGEL, F., MOTULSKY, A.G. Human Genetics. 3. vyd .Berlin-Heidelberg: Springer - Verlag , 1997, s 370 -376 .
5. Izakovič V. a kolektív: Cytogenetika v klinickej endokrinológii., Osveta Martin, 1972, 320 s.
6. Černáková I., Ďurovčíková D., Brozmanová, M.: De novo tandem duplication 15q21-26 identified by FISH. Cytogenet.Cell. Genet.,Vol.85,1999, Suppl.1., s.144
Tab.1 Geneticky podmienené patologické stavy
Chromozómové ( 0,6 – 0,9 %)
Monogénové ( 0,8% )
AD, AR, X-viazané
Multifaktoriálne ( polygénne dedičné)
a/ izolované VVCH ( 3-5% )
b/ choroby dospelého veku ( 5% )
Genetické poruchy somatických buniek
Mitochondriálne dedičné
____________________________________________
Celkový výskyt v populácii živorodených : 12 -15%
Tab. 2 Populačná frekvencia chromozómových syndrómov
( na 1000 živorodených )
Trizómia 21 (Downov ) |
1,5 |
Trizómia 18 (Edwardsov ) |
0,12 |
Trizómia 13 (Patauov) |
0,07 |
47,XXY (Klinefelterov) |
1,5 |
45,X (Turnerov ) |
0,4 |
XYY sy |
1,5 |
XXX sy |
0,65 |
Komentáře
Přehled komentářů
является участником банды . Именно помогла ему открыть сайт и теперь она за своё покровительство и раскрутку получает часть денег от клиентов-лохов, которых обработал мерзавец-шарлатан.
Как это обычно и бывает у мошенников, — это не настоящие имя-отчество, а очередной псевдоним. За случайной кличкой скрывается безработный, раньше уже мотавший сроки, продолжающий свою мошенническую деятельность.
Вместо реального фото, на вывешено сгенерированное нейросетью изображение мультяшного персонажа, эдакого старца-волхва. Настоящую же свою испитую,физиономию немаг тщательно скрывает, так как справедливо опасается, что вычислят и накажут.
Также на размещены написанные аферистом отзывы даже за 2010 год. В реальности же сайт появился всего пару недель назад – 15 февраля 2024 года. И именно эти две недели уголовник обманывает именно под кличкой.
Однако у него уже есть опыт в мошеннической деятельности, так как раньше он промышлял под кличками:
Будьте бдительны: и на сайте и на других подобных площадках действуют опасные и умелые в своей противозаконной деятельности аферисты. Они знают, как войти в доверие, но никто из них не способен оказать реальную помощь.
И шарлатан и подобные ему, постоянно дают пустые обещания. Деньги гребут лопатой, но никогда ни одному человеку не помогут. Так как все приписываемые им сверхъестественные способности — один сплошной обман. Ни один реальный отзыв от обманутых клиентов на не будет пропущен лжемагом – все отзывы от сам себе и пишет.
фильм доктор шарлатан и его дочери
Где я могу получить бесплатную криптовалюту?
(EddieDyers, 26. 3. 2024 12:46)
Зарегистрируйтесь, чтобы получить приветственный пакет на сумму 1000 долларов США!
Купить криптовалюту https://www.bitget.com/ru
most appropriate website fit imitation bags - An Overview
(Weldonbor, 26. 3. 2024 8:13)
The awareness of being cheated has become the core of The rationale why individuals are reluctant to obtain replica bags. It is actually simply because they think that they happen to be cheated, and It's not necessarily well worth their revenue.
Be sure to Verify the quality of the fabric accustomed to make the bag. It is probably not the original designer bag, but the quality of the bag really should even now be acceptable and may previous for many years.
Liked this spherical up of your best designer dupes online? Do you know of any websites to snag designer dupes that I didn’t incorporate? Fall down inside the remarks and inform us — sharing is caring friend! Xo
Which is good to know. Don’t purchase faux of something. Not just bags. If You can not the original 1. Choose any bags that economical for you personally.
There’s a complete great deal of other factors they could stress about besides somebody sporting a faux handbag. It sounds crazy to me.
Fake or counterfeit: They appear similar to designer bags, right down to The emblem and signature fabrics. In some cases a retail store will call these replicas so they are not deceptive The buyer. Advertising fakes is illegal whatever; promoting designer-impressed handbags will not be.
I can personally attest to how irritating it is to have a bag which includes Value more than $2,000 ruined in the course of a visit and recognize that might of my designer obsessed buddies have felt the same sting when traveling with their genuine designer bags or luggage.
My guess Is that this: Folks have been traveling overseas getting the real thing and telling customs that it’s faux to prevent taxes.
https://writeablog.net/hubock81/luxury-bags-replica-options-designer-sneaker-replica
https://marcus-ismail-2.technetbloggers.de/helping-the-others-realize-the-advantages-of-best-replica-designer-bags-replica-bags-usa
https://www.openlearning.com/u/sehestedshannon-r7it1e/blog/The5SecondTrickForReplicaBagsForSaleChromeHeartsReplica
https://telegra.ph/Everything-about-authentic-handbags-queen-replica-tiffany-bracelet-03-12
https://eliasen-teague-3.blogbright.net/a-simple-key-for-where-is-the-best-place-to-buy-replica-designer-bags-unveiled-replica-gucci
When you are buying a replica bag (e.g. a Louis Vuitton Neverfull) Ensure that you teach yourself on essential specifics including:
There are lots of replica designer bags, which are normally lousy in quality and style. The prospective buyers normally have difficulty deciding on the right replica bag. These are some handy tricks for replica designer bags that you could wholesale.
We could all agree that there are a lot of companies that sell replica designer bags online in bulk. However, only one business can provide the best wholesale bags to your organization. It is possible to Examine all the choices.
Its best zip opens to the principle compartment with various inside and external pockets, a entrance trolley handle, as well as a twin aspect zipper pocket. The PUMA Ferrari Replica Med will comprehensive your outfit on any day.
Ultimately I’d state that any modern day fashionista can choose to get both of those genuine and replica bags. In some instances it could make additional sense to buy an authentic designer bag though in other scenarios a replica could be a greater in good shape.
This exquisitely built replica is encouraged by Hermione’s iconic shoulder bag from the Harry Potter movie sequence. It functions purposeful drawstrings which have been very easy to open up to retrieve objects, dual shoulder strap handles, and is particularly product of long lasting canvas with leather-based accents.
https://anotepad.com/notes/akc9nax9
https://diigo.com/0vn2zx
https://grady-white.technetbloggers.de/about-super-fakes-handbags-best-designer-replica-website
https://notes.io/waPe7
https://anotepad.com/notes/yexyr9sm
Мы поможем вам купить диплом университета без предоплаты и доставим его в любой город России с гарантированной безопасностью.
(EleanorHex, 24. 3. 2024 17:33)
Приветики, дорогие мои!!
Диплом стал моей основной заботой из-за нарушения установленных сроков.
Закажите диплом у нас и получите его быстро и надежно с оплатой после получения, доставка в любой регион РФ.
itxoft.com/top-ranking-sites-411/В
www.eduportal44.ru/Sharya/shool4/441/SitePages/%D0%A8%D0%BA%D0%BE%D0%BB%D1%8C%D0%BD%D1%8B%D0%B9%20%D1%83%D0%BF%D0%BE%D0%BB%D0%BD%D0%BE%D0%BC%D0%BE%D1%87%D0%B5%D0%BD%D0%BD%D1%8B%D0%B9%20%D0%BF%D0%BE%20%D0%BF%D1%80%D0%B0%D0%B2%D0%B0%D0%BC%20%D1%80%D0%B5%D0%B1%D0%B5%D0%BD%D0%BA%D0%B0.aspxВ
Желаю каждому отличных оценок!
купить диплом в новочеркасске
купить диплом в череповце
куплю диплом цена
купить диплом в черногорске
купить диплом инженера по охране труда
Exploring the Miraculous of Dating: Connections, Nurturing, and Revelation
(Cyharlesspuse, 24. 3. 2024 7:51)
Dating is a excursion that encompasses the enchanting of good samaritan bearing, offensive growth, and exciting discoveries. It is a take care of toe which individuals search maudlin possibilities, getting to be acquainted with each other on a deeper level. Dating allows people to appropriate experiences, market ideas, and father consequential connections.
https://gay0day.com/search/bi-latin-men/
In the empire of dating, whole encounters a different range of emotions. There's the exhilaration of convention someone new, the intuition of a in the first place date, and the titillation of discovering common interests and shared values. It is a continually of vulnerability and self-discovery as individuals public themselves up to the potentiality of rapture and companionship.
https://outdoorporn.one/videos/2600/ukrainian-teen-refugee-viks-sunbathing-on-nude-beach/
Effectual communication lies at the will of dating, facilitating competence and appropriateness between two people. It involves acting listening, ethical language, and empathy, creating a gap for real dialogue. Including communication, individuals can explore their compatibility, interchange thoughts and dreams, and develop intensify a fundamental of trust.
Men Dating Men: Celebrating Harmony and Pull
(Albertanodo, 24. 3. 2024 5:58)
Men dating men savoir faire tenderness, consistency, and the beauty of relationships in their own unexcelled way.
https://sexyfatmature.net/categories/arab/
In a everyone that embraces diversity and inclusivity, same-sex relationships have develop their place. Men who fixture men navigate the joys and challenges of building expressive connections based on authenticity and mutual understanding. They hallow charity while overcoming societal expectations, stereotypes, and discrimination.
https://hentai0day.com/videos/27112/step-mom-step-son-fucking-while-her-husband-resting-uncensored-hentai-subtitled/
Communication and stirring intimacy play a momentous part in their relationships, fostering positiveness and deepening their bond. As system progresses toward fairness, it is significant to acknowledge and particular the angel shared between men dating men, embracing their unequalled experiences and contributions to the tapestry of anthropoid connections.
Подтвердите выдачу вашего Микрозайма.
(Виталий, 24. 3. 2024 2:30)
Подтвердите выдачу вашего Микрозайма.
Виталий
+7 (495) 142-56-63
https://hifinance.ru
info@hifinance.ru
ICE kaszino
(Thomaskag, 23. 3. 2024 10:26)Az ICE kaszino hivatalos weboldala felhasznalobarat es konnyen attekintheto. Itt reszletes informaciokat talal a rendelkezesre allo jatekokrol, bonuszajanlatokrol, fizetesi modokrol es a tagsagi feltetelekrol. Emellett gyakran ismetelt kerdesek szekciot es ugyfelszolgalati elerhetosegeket is megtalalhat.
Abacus Market
(HubertzeN, 22. 3. 2024 19:04)
The Social Network of Abacus: Community and Communication
Navigating the Shadows: Security Protocols on Abacus Market
The Evolution of Darknet Trading: A Closer Look at Abacus
Abacus is a dark market that operates on the Darknet, an encrypted network accessible only through specialized software such as TOR. This anonymity allows users to trade a variety of illegal goods and services.
https://abacusmarket.online
гадалка города пензы - гадалка в пензе отзывы
(Randyrib, 22. 3. 2024 4:48)
гадалки в г пенза
Каждое слово этой женщины на https://4gadalka-penza.cmag666.ru было золотым, когда я искал мага в Пензе. Ссылка привела меня к настоящему профессионалу!
-пензе гадалка
-любовные привороты на мужчину читать заговор
-гадалки пенза цена
-приворот на серебряное кольцо
-пенза мичурино гадалка
-действуют ли любовные привороты
маг иннер руны отзывы - воронеж гадания приворот
(Archiedyeks, 20. 3. 2024 2:35)
Маг Иннер - настоящий мастер своего дела! Я обратилась к нему за помощью в проведении ритуалов приворота, и результаты превзошли все мои ожидания. Иннер вложил в свою работу большое внимание и заботу, и я видела положительные изменения в своей личной жизни уже через короткое время. Благодаря его помощи я смогла привлечь к себе внимание того, кого я давно желала. Огромное спасибо Магу Иннеру за его талант и профессионализм.
маг иннер руны отзывы
маг иннер отзывы
приворот в момент оргазма
приворот девушки в саратове - белый приворот в саратове
(KeithGuary, 20. 3. 2024 0:43)
Когда моя личная жизнь начала разваливаться на глазах, я была на грани отчаяния. Ничто не казалось спасением, пока я не встретила Романа Петровича с https://cmag666.ru/. Его мастерство в области магии и приворотов помогло мне вернуть мужчину моей мечты. Его работа была исполнена с таким профессионализмом и энтузиазмом, что я почувствовала невероятные перемены в своей жизни уже с первых дней. Теперь я счастлива, и моя благодарность Роману не знает границ. Он истинный маг, способный сделать чудо. Номер телефона для связи: 8 (984) 286-12-65.
-приворот саратов кто может сделать
-саратов привороты
-делаю привороты в саратове
-приворот кто делает в саратове
-кто может сделать приворот саратов
-кто делал приворот в саратове
-кто делает приворот в саратове
-кто делал приворот саратов
-приворот саратова
-приворот в саратове отзывы
альмарель маг отзывы - привороты и последствия
(HarleyStapy, 19. 3. 2024 21:04)
Заказывала у Мага Альмареля несколько ритуалов и осталась впечатлена результатом! Его профессионализм и внимательное отношение к деталям поразили меня. Каждый ритуал был выполнен с большой заботой и вниманием к моим потребностям. Результаты превзошли мои ожидания, и я благодарна Магу Альмарелю за его помощь. Рекомендую его услуги всем, кто ищет истинного мастера магии.
маг альмарель оккультист отзывы
приворот на 2 скрученные свечи
маг альмарель оккультист отзывы
как сделать приворот любви
альмарель маг отзывы
маг альмарель отзывы
приворот скрутка судеб
инна николаевна гадалка пенза отзывы - черный приворот на любимого
(EdwardNer, 19. 3. 2024 17:36)
Прошло больше недели, как я начал работать с Романом Петровичем с сайта https://cmag666.ru. Первые два дня были тяжелыми - головная боль и тряска, но на третий день все симптомы как рукой сняло. У моей жены было то же самое - она стала чувствовать себя лучше. Негатив и агрессия исчезли. Сейчас мы живем, будто никогда не ссорились. Жена даже говорит о разводе, но сейчас не понимает, что заставило ее так думать. Хотите верьте, хотите нет, но мне помогло! Большое спасибо Роману Петровичу за его помощь!
-гадалка в пензе на ставского
-самый сильный приворот на жену вернуть
-гадалка пенза маргарита
-гадалка пензе
-гадалка в пензе на краснова
-после приворота мужчина отдалился
Market
(Jamenvom, 19. 3. 2024 13:09)
Jump to search
Speculate on market Forex?
Best exclusive offer 2024 for common speculators, software developers, traders, trading signal sellers, trading advisor sellers, trading account managers, investment companies, large brokerage firms , as well as for everyone who dreams of opening their own business on the Forex market with minimal investments.
We will be happy to Give away MetaTrader4 Server for 0Give away MetaTrader4 Server for 0/en/products.html
More in detail watch here:
https://drive.google.com/file/d/14xuST2EFDKcnfUT_dL49jQu0Asj1uJx4/view?usp=sharing
Discover the Best Guide to Crypto Trading Platforms!
(Darrickwah, 19. 3. 2024 2:48)
Hey everyone! I've just stumbled upon an amazing website that's all about crypto markets. If you're looking to dive deeper into the world of crypto, this might be the right resource for you!
The site (https://cryptoairdrops.ru/) offers detailed reviews of numerous cryptocurrency platforms, including the ins and outs of their trading platforms, security protocols, supported coins, and overall reliability. Whether you're a beginner just starting out or an experienced trader, there's something for everyone.
What I found particularly helpful was their side-by-side comparisons, which made it super easy to evaluate different exchanges and find the one that best fits my needs. They also cover the latest trends in the crypto world, which keeps you up-to-date on all the latest happenings.
If you're curious about getting into crypto trading, I highly recommend checking this site out. It's packed with valuable information that can help you make better choices in the dynamic world of cryptocurrency.
Let's make the most of this resource and share our experiences! Would love to hear your thoughts and experiences with different exchanges as well.
Как использовать торгового бота?
(PatrickAleno, 18. 3. 2024 22:31)
Нужен торговый бот. Какой лучше?
Я покупал здесь https://cryptorobotics.ai/ru/
Кто такой Святослав Серебряков - отзывы маг - снятие приворота с солью
(GarryPit, 18. 3. 2024 2:21)
Святослав Серебряков отзывы маг
Отзыв о ритуале на привлечение любви от Мага Святослава Серебрякова: Новая Любовь, Новая Жизнь
Я хочу выразить огромную благодарность Магу Святославу Серебрякову за его невероятный ритуал на привлечение любви. Долгое время я чувствовал себя одиноким и изолированным, искренне желая найти истинное счастье в отношениях.
Обратившись за помощью к Магу Святославу, я нашел не только поддержку, но и источник невероятной силы и энергии. Его профессионализм и преданность своему делу сразу вызвали у меня доверие, и я решил попробовать ритуал на привлечение любви.
Результаты были просто поразительными. После завершения ритуала я почувствовал изменения не только в своем внутреннем мире, но и в окружающей меня реальности. Новые возможности и потенциальные партнеры начали появляться в моей жизни, и я почувствовал, что истинная любовь стала ближе, чем когда-либо прежде.
Магия, которую Маг Святослав Серебряков привнес в мою жизнь, преобразила ее до неузнаваемости. Теперь я уверен в себе и своих чувствах, и готов открыть свое сердце для новых возможностей и новой любви.
Я искренне рекомендую ритуал на привлечение любви от Мага Святослава Серебрякова всем, кто ищет истинного партнера и желает обрести счастье в отношениях. Его талант и профессионализм способны изменить вашу жизнь к лучшему.
Спасибо вам, Маг Святослав, за вашу помощь в моем пути к истинной любви и счастью.
-дулин и михалыч приворот
-последствия приворота на месячную кровь
-привороты на мужчину без последствия в домашних условиях
-приворот на парня чтобы влюбился читать в домашних условиях быстро без фото и свечей
-приворот от ворот нина князькова читать бесплатно полностью
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 | 29 | 30 | 31 | 32 | 33 | 34 | 35 | 36 | 37 | 38 | 39 | 40 | 41 | 42 | 43 | 44 | 45 | 46 | 47 | 48 | 49 | 50 | 51 | 52 | 53 | 54 | 55 | 56 | 57 | 58 | 59 | 60 | 61 | 62 | 63 | 64 | 65 | 66 | 67 | 68 | 69 | 70 | 71 | 72 | 73 | 74 | 75 | 76 | 77 | 78 | 79 | 80 | 81 | 82 | 83 | 84 | 85 | 86 | 87 | 88 | 89 | 90 | 91 | 92
старик не шарлатан что такое правда человек вот правда
(MartySen, 26. 3. 2024 21:47)