I. Genetické minimum - chromozómové choroby a ich diagnostika
Ďurovčíková Darina
Klinika lekárskej genetiky SZU a FNsP, Bratislava
Úvod
Genetické choroby vznikajú v dôsledku mutácii na úrovni génu, alebo väčšej časti genómu, v interakcii s exogénnymi faktormi. Výskyt geneticky podmienených patologických stavov ( tab.1), alebo predispozícia k nim sa podľa viacerých štatistík odhaduje na 12-15% (1,2).
Etiologickú rôznorodosť spôsobujú rôzne typy genetických defektov, detekcia ktorých si vyžaduje špecifické laboratórne metódy (tab.1). V ostatnom čase sme zaznamenali ich významný pokrok, týkajúci sa najmä rozvoja genetických diagnostických testov, ktoré majú priamy dopad na manažment komplexnej starostlivosti o pacientov a rizikových členov rodiny. Pre včasnú diagnostiku a prevenciu genetických ochorení je dôležité vzdelávanie a transfer poznatkov do praxe každého lekára. Potrebe začlenenia najnovších poznatkov z medicínskeho výskumu a genetiky do pregraduálneho a postgraduálneho vzdelávania sú venované osobitné príspevky na blížiacej sa konferencii AMEE (Association of Medical Education in Europe). Forsíruje sa dostupnosť vedomostí s cieľom rozpoznať genotypo-fenotypové korelácie najmä vo vzťahu k liečbe a celkovej zdravotnej starostlivosti (3). Iné asociácie a spoločnosti (ESHG, OECD) odporúčajú vzdelávanie v uvedených oblastiach vrátane genomiky a proteomiky zaradiť aj do mimoprofesného vzdelávania pracovníkov v zdravotníctve ako aj pre širokú laickú verejnosť. Primeraná úroveň vzdelania zbavuje neopodstatnených obáv z genetiky, ktorá je v 21.storočí neoddeliteľnou súčasťou liečebno-preventívnej starostlivosti.
S potešením možno konštatovať, že uvedené odporúčania u nás viac rokov akceptujeme. Otázky genetického testovania, algoritmy genetickej diagnostiky, správnej laboratórnej praxe, etiky a legislatívy v odbore sú náplňou pravidelných školiacich aktivít na SZU.
Zároveň sú pre nás ambíciou zaplniť priestor v tomto periodiku na pokračovanie, ktorého obsahom bude minimum genetických poznatkov. Prvú časť venujeme chromozómovým ochoreniam a prehľadu ich diagnostických metód.
I. Chromozómové choroby
Chromozómové anomálie pozorujeme ako zmeny na chromozómoch , ktoré môžu byť :
- vrodené (konštitučné)
- získané (v priebehu života napr. malígnym procesom v bunke).
Vrodené chromozómové anomálie spôsobujú zmenou počtu, alebo štruktúry chromozómov génovú nerovnováhu a upozornia na seba závažnou poruchou morfogenézy. Pre autozómové anomálie je typický výskyt VVCH spolu s mentálnou retardáciou (obr.1). Anomálie pohlavných chromozómov sprevádzajú poruchy rastu a somatosexuálneho vývinu a sú z klinického hľadiska menej závažné. Vyhľadávanie ich zvýšeného rizika sa uskutočňuje celoplošným prenatálnym biochemický skríningom ( sAFP a betaHCG ) u tehotných žien v rozmedzí 16-18 týždňa gravidity. Vrodené a získané chromozómové anomálie potvrdíme cytogenetickým vyšetrením pri ktorom sa stanoví karyotyp. Výskyt chromozómových chýb v populácii živorodených je cca 1% (2.4).
Diagnostické známky na klinickej úrovni
Na chromozómové ochorenia u novorodenca upozorňuje prítomnosť vrodených vývinových chýb (VVCH) , ktoré sú zastúpené v ich etiológii cca 5%. Signálmi pre chromozómovú anomáliu bývajú nevysvetliteľná polystigmatizácia, tonusové poruchy, rôzne patologické parametre zistené prenatálnym ultrazvukovým vyšetrením plodu ako sú: mikrocefalia, zhrubnutá nuchálna riasa, rastová retardácia a rôzne orgánové anomálie a iné. Neskôr to býva mentálna retardácia, zaostávanie rastu, pubertálneho vývinu, nástupu menštruácie a iné. V dospelosti sa konštitučná chromozómová anomália diagnostikuje skôr výnimočne. Ich záchyt pozorujeme pri vyšetrení párov pre poruchy fertility a reprodukcie v podobe anomálií pohlavných chromozómov, zriedkavých foriem malých gonozómových mozaík a vyvážených chromozómových prestávb.
Charakteristika a rozdelenie
Predstavujú odchylky od normálnej chromozómovej výbavy somatickej bunky, ktorá obsahuje 22 párov autozómov (1-22 ) a pár pohlavných chromozómov – gonozómov (XX, alebo XY). Najčastejšou príčinou vzniku aneuploidie je nondisjukcia, alebo patologické rozdelenie chromozómov v meióze, ktoré vzniká prezygoticky. Zriedkavo sú dôsledkom postzygotickej poruchy mitotického bunkového delenia. Tieto javy sú väčšinou náhodné, aj keď sa pripúšťa, že určité rodiny môžu mať sklon k nondisjuncii (asynchrónne delenie pri predčasnom delení centroméry). Len istá malá časť chromozómových anomáli vzniká zákonite v dôsledku vyvážených anomálií (prestavieb chromozómov), ktoré sa vyskytujú v populácii ich zdravých prenášačov s frekvenciou menej ako 0,2% (4)
Rozdelenie podľa (I a II) zohľadňuje typy chromozómov a konkrétne zmeny.
I. Rozdelenie podľa typu chromozómov
A./ AUTOZÓMOVÉ
B./ GONOZÓMOVÉ
II. Podľa typu zmien v počte a štruktúre chromozómov:
a/ numerické - odchýlky od normálneho počtu diploidnej sady chromozómov somatickej bunky. Môže ísť nadpočetný chromozóm z páru ( trizómia ), chýbajúci ( monozómia ), dva nadpočetné chromozómy z páru ( tetrazómia ) , násobky sady chromozómov ( triploidie ) a iné odchylky od normálneho počtu (aneuploidie ). Z autozómových anomálií k nim patrí trizómia 21 - Downov syndróm. Ide o najčastejšiu chromozómovú anomáliu, ktorej výskyt populácii je od od 1:750-1000 živorodených. Medzi ďaľšie zvyčajne neonatálne letálne trizómie patria Patauov ( trizómia 13 ) a Edwardsov ( trizómia 18 ) syndróm.
Trizómia môže byť voľná, náhodná forma s nízkym rizikom rekurencie, alebo translokačná. Táto mohla vzniknúť ako mutácia de novo, alebo dôsledkom vyváženej translokácie jedného z rodičov. Z gonozómových anomálií má najčastejší výskyt monozómia X, alebo Turnerov ( karyotyp 45,X0 ) a Klinefelterov syndróm ( karyotyp 47,XXY), ktoré sa zisťujú v čistej, alebo mozaikovej forme. Výskyt vybraných chromozómových anomálií je v tabuľke č.2.
b/ štruktúrové - charakterizuje zmena štruktúry chromozómu vizualizovateľné ako prestavby krátkeho (p) a / alebo dlhého ramienka (q) chromozómu. Patria sem chýbanie určitého úseku chromozómu (delécia), alebo zmnoženie (duplikácia) istého úseku chromozómu. Ďalej sú to premiestnenie časti chromozómu na iný (translokácia), alebo iné tvarové zmeny chromozómov ( prstencový chromozóm, izochromozóm). Príkladom autozómovej štruktúrovej anomálie je syndróm mačacieho plaču (Cri-de-Chat sy ), ktorý spôsobuje delécia úseku krátkeho ramienka chromozómu č.5 (obr.2) Zjednodušený zápis karyotypu u chlapca s týmto syndrómom je 46,XY, 5p-. Z gonozómových anomálií sa pomerne často vyskytuje prstencový chromozóm X - karyotyp 45,X r(X), alebo izochromozóm, ktorý sa u ženy manifestuje ako Turnerov syndróm (5). Submikroskopické zmeny, kryptické translokácie nie sú možné touto metódou obsiahnúť.
c/ mozaiky: predstavujú prítomnosť viacerých bunkových klonov s rozdielnou chromozómovou výbavou. Pozorujeme ich v bunkách ako rôzne chromozómové línie, nezriedka ako minoritné, s frekvenciou menšou ako 10%. Na ich detekciu je potrebné zhodnotiť väčšie množstvo mitotických figúr. Časté sú napríklad mozaikové formy Turnerovho syndrómu, Klinefelterovho syndrómu. U týchto pacientov teda nájdeme v bunkách karyotyp s normálnym a patologickým chromozómovým nálezom. Zápis karyotypu obsahuje viacero línii a začína sa zvyčajne najpočetnejšie zastúpenou. Mozaika Turnerovho syndrómu môže mať aj takýto nezvyčajný karyotyp ( 45,XO/46,XX/46,XY ). V tomto prípade prevažuje línia s chýbajúcim X chromozóm, prítomná je aj normálna a minoritná s prítomnosťou Y chromozómu. Existujú aj iné varianty s prstencovým, alebo s izochromozómom.
Genetické diagnostické testy
Chromozómové anomálie najčastejšie diagnostikujeme laboratórnymi technikami, ktoré poskytujú kompletnú analýzu karyotypu. V ostatnom čase sa klasické metódy identifikácie chromozómov dopĺňajú o nové zobrazovacie metódy, ktorými sa odhaľujú predtým nepoznané prestavby na submikroskopickej úrovni (5,6).
Klasická metóda cytogenetického vyšetrenia je založená na analýze metafázových chromozómov získaných mitotickým delením kultivovaných lymfocytoch, ktoré sa farbia konvenčne a prúžkovacími metódami (C, G, R, Q). Detekuje numerické a štruktúrové anomálie na úrovni do 550 bandov. Vyššiu rozlišovaciu schopnosť dosiahneme metódou HRT (High resolution method), kde sa hodnotia dlhšie prometafázické chromozómy. Vyšetrenie karyotypu touto metódou vyžaduje odbornú skúsenosť a pre jej náročnosť ju nahrádzajú iné modernejšie metódy farebnej cytogenetiky (6).
Klasická cytogenetika sa rutinne využíva v diagnostike konštitučných chromozómových anomálií u pacientov s vrodenými vývinovými chybami (VVCH), mentálnou retardáciou ( MR ), poruchami rastu a pohlavného vývinu, alebo pri opakovaných spontánnych potratov. V neposlednej rade aj v prenatálnej diagnostike u plodu, ktorá sa uskutočňuje po stanovení ich rizika klinickým genetikom. Gonozómové anomálie, najmä v nizkopercentnej mozaikovej forme (Turnerov, Klinefelterov syndróm) sa môžu výnimočne diagnostikovať až pri poruchách reprodukcie v dospelom veku. Klasická metóda umožní záchyt štruktúrových anomálií a mnohonásobných chromozómových prestávb, ktoré sú typické pre syndrómy chromozómovej instability s rizikom malignity. Príkladom sú Fanconiho anémia, Ataxia teleangiektázia, Nijmegenský syndróm a iné. Manifestujú sa zvýšenou lomivosťou chromozómov. Najčastejšie sa pri týchto syndrómov zistí instabilná chromozómová translokácia 7/14, spolu s inými štruktúrovými zmenami a figúrami ( gapy, breaky, triradiály, kvadruradiály), ktoré bývajú v rôznom percentuálnom zastúpení (obr.3).
Fluorescenčná in situ hybridizácia ( FISH ) metóda používa metódy molekulovej cytogenetiky. Umožní diagnostiku chromozómových prestávb na submikroskopickej úrovni ( < 800 bandov ), ktoré nie sú vizualizovateľné klasickou technikou . Ide najmä o mikrodelečné a mikroduplikačné syndrómy a pomáha tiež odhaliť nízkopercentné mozaiky. Princípom je detekcia signálov po hybridizácii pacientovej chromozómovej DNA so špecifickými sondami (centromerickými, celochromozómovým, alebo lokusovo špecifickými) použitými podľa potreby (obr.4 ). Centromerické sondy sa používajú na zisťovanie numerických chromozómových chýb s dôkazom prítomnosti centromér, telomerických sekvencií a obsahu heterochromatínu. Celochromozómové sondy hybridizujú so svojim homológom pozdĺž celého chromozómu. Sú vhodné na diagnostiku štruktúrových anomálií chromozómov ako sú translokácie, delécie, inverzie. Lokusovo špecifické, alebo génové sondy hybridizujú do oblasti hľadaných konkrétnych sekvencii. Tento typ sond, veľkosti cca 150 kb, sa využíva k diagnostike mikrodelečných syndrómov ako sú napríklad najznámejšie z nich ( Praderov-Williho, Angelmanov, Di-Georgov, Wiliamsov-Beuerenov). Výhodou tejto metódy je hodnotenie signálov na väčšom počte chromozómov aj bunkových jadier. Použitie FISH a iných DNA metód detekujúcich sekvencie v oblasti SRY chromozómu Y umožňuje pri mozaikových formách Turnerovho syndrómu vyhľadávať pacientky s rizikom gonadoblastómu.
Kombinácia klasických a molekulovo cytogenetických metód sa využíva v onkogenetike pri diagnostike a liečbe hemoblastóz, vrátane monitorovania reziduálnej choroby a postransplantačných stavoch. Chronickú myeloickú leukémiu potvrdzuje výskyt chromozómu Philadelphia, ktorý vzniká v dôsledku translokácie medzi dlhými ramenami
Iné modifikované techniky
CGH - Komparatívna genómová hybridizácia je založená na porovnávaní dvoch fluorescenčne značených vzoriek DNA ( referenčnej a pacientovej), ktoré hybridizujú s normálnymi metafázovými chromozómami. Pacientová testovaná DNA je značená zeleným flurochrómom a referenčná vzorka ( DNA od zdravého jedinca s normálnym karyotypom ) sa označuje červeným. V pomere 1:1 sa obidve nechajú hybridizovať na preparáte s normálnymi chromozómami. Nerovnováhu v testovanej vzorke zistíme vyhodnotením pomeru intenzity zelenej a červenej fluorescencie pomocou špeciálneho softwaru. Využíva sa v nádorovej cytogenetike na skrínovanie chromozómovej nerovnováhy. Metóda však presnejšiu identifikáciu prestavby neumožňuje.
Multicolor FISH- mnohonásobná farebná fluorescentná in situ hybridizácia K detekcii zmien sa používa zmes rozdielne značených sond 5 fluorochrómami a ich vzájomnou kombináciou, čím sa docieli rozlíšenie všetkých chromozómov. Na vyhodnotenie je potrebná digitálna zobrazovacia mikroskopia s filtrami, CCD kamera a počítačový software k analýze obrazu. Na základe fluorochrómovej kompozície sa každému chromozómu určí tzv.pseudofarba..Táto metóda sa používa na identifikáciu zložitejších translokácií a prestavieb medzi viacerými chromozómami. Neumožňuje detekciu vnútrochromozómových zmien typu inverzií a malých delécií.
SKY - spektrálne karyotypovanie je variantom mnohofarebnej FISH, každému chromozómu je tiež pridelená pseudofarba. Kombinuje snímanie obrazu trojakým filtrom CCD kamerou s Fourierovou spektroskopiou a príslušným počítačovým programom.
mBAND - metóda mnohonásobného pruhovania - je založená na podobnom princípe ako FISH. Podstatou m.-pruhovania je označenie jedného chromozómu viacerými značenými sondami. V kombinácii sa tiež používa 5 fluorochrómov. Každá sonda hybridizuje s inou časťou chromozómu. Na základe hybridizačných signálov dochádza k tvorbe priečnych farebných pruhov po celej dĺžke chromozómu.
Záver: Zlatým štandardom klinickej cytogenetiky je vyšetrenie karyotypu klasickou metódou. S pribúdajúcimi dôkazmi o výskyte submikroskopických chromozómových zmien, kryptických prestávb modernými laboratórnymi technikami sa zvyšuje pravdepodobnosť odhaliť kauzálnu súvislosť s etiologicky neobjasnenou mentálnou retardáciou a polystigmatizáciou.
Literatúra:
1. Smith, C. J., Donnai , D.: Human malformation. In: Emery and Rimon´s Principles and Practice of Medical Genetics. 3.vyd. New-York: Churchill Livingstone, 1998, s. 687 - 696.
2. Thompson and Thompsonová : Genetics in medicine, W.B.Saunders company, 6-th Ed., 2001, s.443.
3. Internetové adresy: www.amee.org
4. VOGEL, F., MOTULSKY, A.G. Human Genetics. 3. vyd .Berlin-Heidelberg: Springer - Verlag , 1997, s 370 -376 .
5. Izakovič V. a kolektív: Cytogenetika v klinickej endokrinológii., Osveta Martin, 1972, 320 s.
6. Černáková I., Ďurovčíková D., Brozmanová, M.: De novo tandem duplication 15q21-26 identified by FISH. Cytogenet.Cell. Genet.,Vol.85,1999, Suppl.1., s.144
Tab.1 Geneticky podmienené patologické stavy
Chromozómové ( 0,6 – 0,9 %)
Monogénové ( 0,8% )
AD, AR, X-viazané
Multifaktoriálne ( polygénne dedičné)
a/ izolované VVCH ( 3-5% )
b/ choroby dospelého veku ( 5% )
Genetické poruchy somatických buniek
Mitochondriálne dedičné
____________________________________________
Celkový výskyt v populácii živorodených : 12 -15%
Tab. 2 Populačná frekvencia chromozómových syndrómov
( na 1000 živorodených )
Trizómia 21 (Downov ) |
1,5 |
Trizómia 18 (Edwardsov ) |
0,12 |
Trizómia 13 (Patauov) |
0,07 |
47,XXY (Klinefelterov) |
1,5 |
45,X (Turnerov ) |
0,4 |
XYY sy |
1,5 |
XXX sy |
0,65 |
Komentáře
Přehled komentářů
Cool + for the post
Ясновидящая Лариса Петровна - как то не очень - заказала порчу у https://cmag666.ru Ватсап 8 (984) 286-12-65
(EdwardMaymn, 23. 2. 2024 0:13)
Ясновидящая Лариса Петровна не внушает доверие - заказала снятие порчи у https://cmag666.ru Ватсап 8 (984) 286-12-65
приметы как вернуть любимого человека - заговор на еду на любовь мужчины читать
приворот на женатого форум заказала у https://cmag666.ru Ватсап 8 (984) 286-12-65
(ErickSex, 22. 2. 2024 23:58)
Отзывы - Помогли сделать - приворот мужчины женатого https://cmag666.ru Ватсап 8 (984) 286-12-65
проверенные маги санкт петербург - ворожея анастасия отзывы проверенный маг
1 семена интернет магазин
(DuaneKix, 22. 2. 2024 22:54)
интернет магазин семь семян каталог 7семян ру интернет магазин официальный сайт каталог
onsad ru интернет магазин семян онлайн магазин 7 семян https://liectroux-c30b.ru семена ярославль сидпост интернет магазин каталог
семена ру интернет магазин
Incognito market
(RobertReulp, 22. 2. 2024 15:30)
Catching Shadows: The Difficulty in Policing Incognito Market
User Experience on Incognito: Navigating the Darknet with Ease
Cryptocurrency and Anonymity: The Lifeblood of Incognito Market
Incognito Darknet Market is an online marketplace on the Darknet accessible through anonymous networks such as Tor. It is one of the oldest and most reliable darknet markets, providing access to various goods and services that cannot be found on the regular Internet.
https://incognitomarkets.org
Мое откровение или как вернуть мужчину симорон
(Michaelecomy, 22. 2. 2024 13:47)
молитва чтобы вернуть мужа - Помощь мага https://cmag666.ru если мужчина любит вернет женщину
______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
История отзыв о путешествие к спасению моего брака (обращение к магу (8 (984) 286-12-65) - https://cmag666.ru)
___________________________________________________
Моя история началась со сложного выбора: либо смириться с невозможностью сохранить наш брак, либо попробовать что-то необычное. В своем отчаянии я решила пойти на риск и обратиться за помощью к магу Роману Петровичу.
Поиск Решения
Сколько ночей я провела в бессонных думах, искав ответы на вопросы, которые казались безнадежными. Мои попытки найти выход из тупика всегда заканчивались разочарованием. Но однажды я услышала о маге, который помог многим вернуть потерянное счастье.
_______________________________________________________________________________________________________________________________
Встреча с Магом
Решившись на последний шанс, я связалась с Романом Петровичем по ватсап Ватсап 8 (984) 286-12-65. Его уверенность и спокойствие успокоили меня, и я почувствовала, что это человек, который может помочь. Он выслушал мою историю с пониманием и предложил варианты решения проблемы.
_______________________________________________________________________________________________________________________________
Проведение Ритуала
Когда пришло время проводить ритуал, я была полна сомнений и страхов. Но сопровождение и поддержка Романа Петровича во время всего процесса давали мне надежду. Я стала верить, что волшебство может существовать в реальности.
_______________________________________________________________________________________________________________________________
Возвращение Мужа
Спустя некоторое время после ритуала, я заметила, что что-то меняется. Мой муж стал проявлять больше внимания и заботы. Мы снова начали общаться, и я ощутила, что наша связь стала сильнее и более гармоничной.
________________________________________________________________________________________________________________________________
Спасение Брака
По мере того, как время шло, наш брак становился все крепче. Мы смогли преодолеть все трудности вместе, и я поняла, что магия Романа Петровича действительно сработала. Он вернул нам счастье и гармонию.
________________________________________________________________________________________________________________________________
Моя история - это история о вере в чудеса и о том, что даже самые безнадежные ситуации могут измениться. Благодаря магии Романа Петровича, я спасла свой брак и вернула свою семью. Если вы столкнулись с подобными проблемами, не бойтесь попробовать нечто необычное.
___________________________________________________
У этого человека также есть сайт https://cmag666.ru
Но можно написать и в ватсап сразу 8 (984) 286-12-65
став вернуть любовь мужчины - Ватсап 8 (984) 286-12-65 - https://cmag666.ru
руны вернуть мужчину - Ватсап 8 (984) 286-12-65 - https://cmag666.ru
фразы чтобы вернуть мужчину - Ватсап 8 (984) 286-12-65 - https://cmag666.ru
Отзывы реальных людей - отзывы кто делал приворот на куклу вуду - отзывы о приворотах вуду
(Tobiasged, 22. 2. 2024 0:46)
Хочу выразить благодарность магу Роману Петровичу с сайта cmag666.ru за его Вуду-приворот! Результаты просто поразительны! Моя давняя мечта о встрече с идеальным партнером осуществилась благодаря его ритуалу. Я счастливее, чем когда-либо! Благодарю вас, Роман Петрович, за ваш талант и помощь!
Запросы сайта в поиске
___________________________________________________________
кто делал вуду приворот отзывы приворот на куклу вуду кто делал отзывы вуду приворот кто делал отзывы
приворот по вуду кто делал отзывы отзывы кто делал приворот на куклу вуду приворот на куклу вуду кто делал отзывы
Отзыв об Александре magpomosh ru - magpa666 @ bk ru настоящий маг бесплатно
(Michaelcicle, 22. 2. 2024 0:33)
Отзыв о работе мага Александры (magpa666 @ bk ru) - magpomosh ru
_________________________________
После долгих месяцев страданий и разочарований в отношениях, я решил обратиться за помощью к магу Александре с сайта magpomosh ru . Моя жизнь казалась серой и безысходной, пока я не нашел ее. С первых минут общения с Александрой я ощутил ее искреннее желание помочь мне. Она выслушала меня внимательно и предложила план действий, который мне показался разумным и эффективным.
Заказав у Александры ритуал приворота, я не ожидал таких результатов. Всего через несколько недель моя долгожданная вторая половинка появилась в моей жизни. Отношения стали гармоничными, а любовь наполнила мое сердце новыми эмоциями и чувствами. Я благодарен магу Александре за ее мудрость, профессионализм и дар помогать людям в их жизненных трудностях. Спасибо вам, Александра, за вашу помощь!
_____________________________________________________
Настоящий маг Александра (magpa666 @ bk ru) - magpomosh ru
_________________________________________________________
Сайт ищут по тегам:
маг настоящий как найти мага для приворота настоящего ты настоящий маг
как найти мага настоящего отзывы о настоящих магах которые действительно помогли найти настоящего мага отзывы
союз магов россии официальный сайт список настоящих что отличает настоящего мага от шарлатана проверенные маги колдуны ведьмы
черные маги проверенные как понять настоящий маг или нет проверенные маги отзывы о них
Actum est ilicet! ))
(psygogo, 21. 2. 2024 13:03)Cognata vocabula rebus — Слова, соответствующие поступкам
Отзывы svetlanamag ru - отзывы svetlanamagg @ yandex настоящий маг интернете
(DavidSoync, 21. 2. 2024 11:41)
svetlanamag ru - svetlanamagg @ yandex ru
Моя подруга посоветовала мне обратиться к магу Светлане за ритуалом приворота, чтобы привлечь внимание парня. Результат превзошел все мои ожидания! Мой парень стал проявлять ко мне больше внимания, чем раньше.
-настоящие реальные маги
-признаки настоящего мага
-помогите мне найти настоящего мага
-сильный маг проверенный
Приворот Новосибирс - отзыв или история одного приворота - приворот в новосибирске кто делает
(AlbertEmant, 21. 2. 2024 4:39)
Отзыв о заказе любовного приворота на мужа у мага Романа Петровича с сайта https://cmag666.ru
Я хочу поделиться своим невероятным опытом работы с магом Романом Петровичем. Все началось с того, что я не могла найти подходящего мага для выполнения любовного приворота в Новосибирске. Множество попыток обратиться к разным специалистам, оставались безуспешными, и я начала терять надежду на то, что смогу вернуть своего мужа обратно к себе.
Однако, когда я услышала о маге Романе Петровиче с Дальнего Востока, я решила дать еще один шанс магии. И я ни разу не пожалела об этом решении!
С самого начала общения с Романом Петровичем я почувствовала его глубокое понимание и энергию, которая излучала уверенность и профессионализм. Он выслушал мои проблемы и дал мне четкий план действий для восстановления отношений с моим мужем.
Когда был выполнен приворот, я ощутила сильную энергию перемен в нашей семье. Мой муж начал проявлять к нам больше внимания, стал более заботливым и внимательным. Наша связь стала крепче, и мы снова почувствовали ту любовь и страсть, которая когда-то была между нами.
Я благодарна Роману Петровичу за его невероятные способности и за помощь во время трудного периода в моей жизни. Он действительно талантливый и профессиональный маг, и я рекомендую его всем, кто ищет решение своих проблем через магию.
Если вы находитесь в трудной ситуации и нуждаетесь в помощи мага, обратитесь к Роману Петровичу - он точно поможет вам изменить вашу жизнь к лучшему!
Сайт мастера магии https://cmag666.ru
Сайт ищут по тегам
_______________________________________________________________
-привороты в новосибирска
-приворот новосибирске отзывы кто делал
-приворот на любовь в новосибирске
-приворот в новосибирске объявления
-кто в новосибирске делает приворот
Exploring the Fascinating of Dating: Connections, Nurturing, and Revelation
(Cyharlesspuse, 21. 2. 2024 0:40)
Dating is a go abroad that encompasses the spell of good-natured bearing, live growth, and alluring discoveries. It is a take care of to which individuals explore dreamt-up possibilities, getting to be acquainted with each other on a deeper level. Dating allows people to appropriate experiences, truck ideas, and design deep connections.
https://erhe.me/tags/married/
In the realm of dating, undivided encounters a different string of emotions. There's the exhilaration of meeting someone trendy, the intuition of a basic swain, and the thrill of discovering stale interests and shared values. It is a ease of vulnerability and self-discovery as individuals obtainable themselves up to the potentiality of inclination and companionship.
https://erhe.me/tags/gay-sissy-crossdresser/
Striking communication lies at the essence of dating, facilitating accord and connection between two people. It involves effective listening, virtuous declaration, and empathy, creating a range on veritable dialogue. From top to bottom communication, individuals can explore their compatibility, interchange thoughts and dreams, and develop intensify a foundation of trust.
? РРіСЂРѕРІРѕР№ Автомат Treasures of the Lamps Рграть Онлайн Бесплатно Playtech
(Romral, 21. 2. 2024 0:25)
? РРіСЂРѕРІРѕР№ Автомат Treasures of the Lamps Рграть Онлайн Бесплатно Playtech
https://megamore.ru/map3.php - yesil sogan ekimi
https://katyakesian.ru/map7.php - мини игры в казино
https://mediera.ru - титан казино бездепозитный бонус
Badger Miners Slot: Полное руководство и стратегия выигрыша.
Введение Слот Badger Miners – захватывающая азартная игра, которая привлекает внимание множества игроков своим уникальным дизайном и потенциалом для крупных выигрышей. Если вы ищете новый и захватывающий опыт в мире онлайн-гемблинга, Badger Miners - отличный выбор.
https://andamanhotels.in/2020/05/25/10-best-andaman-islands-hotels/#comment-557929 - Ігровий автомат Silver Fang грати онлайн безкоштовно 6ebe8d0
круизы из санкт петербурга 2023 год
(DannyMix, 20. 2. 2024 13:44)
Мечтаете о незабываемом отдыхе, который сочетает в себе удивительное путешествие Открытие Водных Путей водоход официальный сайт круизы на 2023 из москвы https://cruiz-iz-spb.ru/ Путеводитель по Увлекательным Маршрутам
и знакомство с новыми культурами? Тогда круиз в Калининград – то, что вам нужно! Этот маршрут доступен на теплоходе по Волге, откуда вы сможете насладиться живописными пейзажами, посетить уникальные исторические места и познакомиться с культурным наследием России.
Почему стоит выбрать именно круиз в Калининград?
круиз на теплоходе по волге из спб
https://cruiz-iz-spb.ru/
Уникальная возможность увидеть Россию во всей ее красе. Во время круиза вы посетите такие города, как Москва, Нижний Новгород и Казань, каждый из которых имеет свою уникальную историю, архитектуру и культурные особенности.
Доступные цены. Круизы по Волге стоят значительно дешевле, чем авиаперелеты в те же города. Более того, в стоимость путевки обычно включены питание, развлечения на борту и экскурсии.
Незабываемый отдых. Круиз на теплоходе – это не только возможность насладиться красивыми видами и познакомиться со страной, но и провести время в кругу новых друзей и единомышленников.
Возможность познакомиться с культурой разных народов, проживающих на территории России. Во время посещения городов вам представится возможность узнать больше о традициях, обычаях и кухне разных народов.
Отзыв - заказать или сделать приворот дома - заказал приворот
(JeremyNix, 20. 2. 2024 11:34)
Мой отзыв о том, как я заказал приворот у мага
В августе этого года я столкнулся с самым непредсказуемым испытанием - узнал, что моя жена в течение двух лет вела роман на работе после двадцатилетнего брака и троих детей. Наша семья была на грани разрушения, и я честно говоря, не знал, что делать в этой ситуации. Оба мы были виноваты, и мне казалось, что нет выхода. Тогда я обратился к Роману Петровичу через его страничку https://cmag666.ru , и могу сказать, что это было одним из самых лучших решений в моей жизни.
После того, как Роман Петрович провел расклад карт, который оказался точным от начала и до конца, у меня появилась надежда. Он подобрал магическую работу, а затем выполнен был ритуал с защитным щитом и привязкой на огонь (подробности можно найти на его блоге). Сегодня, в декабре, я рад сообщить, что благодаря его помощи я вернул любимого человека и спас нашу семью. Наши отношения перешли на качественно новый уровень во всех аспектах.
Однако, я хочу подчеркнуть, что магия не сделает всё за вас. Вам также придется приложить значительные усилия и измениться, если вы хотите добиться успеха. Перед Романом Петровичем я преклоняю колени - без его помощи я бы не был так счастлив. Если у вас возникли подобные проблемы, я настоятельно рекомендую обратиться к Роману Петровичу.
Сайт ищут по тегам
- маги заказать приворот
- заказать приворот на любовь
- заказать приворот парня
- кладбищенский приворот заказать
- приворот заказать бесплатно
Отзыв о привороте- приворот в екатеринбурге кто
(LarryMat, 20. 2. 2024 11:27)
Отзывы о приворотах в Екатеринбурге
-----------------------------------------
Хочу поделиться своим удивительным опытом работы с магом Романом Петровичем с сайта https://cmag666.ru. Когда я оказалась в сложной ситуации со своим любимым человеком, я решила обратиться за помощью к магам в своем городе, Екатеринбурге. Но все мои попытки не принесли ожидаемых результатов.
Пройдя через множество встреч и консультаций, я уже начала терять надежду. Но случайно наткнулась на сайт Романа Петровича, и что удивительно, он оказался из Дальнего Востока, родины шаманов, той же местности, где я жила с рождения и до 12 лет. Это заинтересовало меня, и я решила попробовать еще раз.
С Романом Петровичем мы обсудили мою ситуацию, и он предложил мне кладбищенский приворот для восстановления отношений с моим любимым человеком. Решив довериться его опыту, я приступила к работе с магом по ритуалу с надеждой на лучшее.
С каждым днем я замечала, как наша связь становилась все ближе и крепче. Мы стали общаться более открыто и искренне, а мои чувства к нему только усилились. Благодаря кладбищенскому привороту, наши отношения стали еще более крепкими и стойкими.
Работа Романа Петровича действительно поразила меня. Его внимание к деталям и профессионализм впечатлили меня. Благодаря его помощи я снова чувствую, что моя жизнь наполнена смыслом и радостью. Он настоящий мастер своего дела, и я безмерно благодарна ему за все, что он сделал для меня.
Я рекомендую Романа Петровича всем, кто столкнулся с проблемами в своих отношениях. Его помощь – это настоящий подарок судьбы, который может изменить вашу жизнь к лучшему. Спасибо, Роман Петрович, за ваше волшебство и профессионализм!
- приворот любимого в екатеринбурге
- сильный приворот екатеринбург
- привороты в екатеринбурге
- в екатеринбурге приворот
- привороты в екатеринбурге
Реальный Отзыв о привороте в Москве - гадалки в москве приворот
(Thomasedick, 20. 2. 2024 9:48)
Вот мой реальный отзыв о заказе приворота на мужа.
_____________________________________________________
Я долго искала хорошего мага в Москве, но, кажется, все мои попытки были напрасными. Разочарованная и безнадежная, я стала обращаться к друзьям и знакомым за советом. И тут одна из моих подруг порекомендовала мне обратиться за помощью к магу с Дальнего Востока - Роману Петровичу с сайта.
Сначала я была немного скептически настроена - ведь удаленное заклинание казалось мне чем-то из области фантастики. Но моя подруга уверяла меня, что Роман Петрович - настоящий профессионал в своем деле. И я решила попробовать.
Когда я связалась с Романом Петровичем через его сайт https://cmag666.ru и рассказала ему о своей ситуации, он проявил искреннее понимание и сострадание. Он объяснил мне, как работает приворот, и какие изменения я могу ожидать. Я заказала у него приворот на моего мужа и начала ждать результатов.
Через несколько недель я заметила, что мой муж стал относиться ко мне по-другому. Он стал более внимательным и заботливым, и наши отношения начали испытывать явное улучшение. Я была поражена результатом!
Сейчас, когда я смотрю на нашу семью, я благодарна Роману Петровичу за его помощь. Он действительно знает свое дело и умеет помогать людям в трудных ситуациях. Если у вас есть проблемы в отношениях и вы ищете решение, я настоятельно рекомендую обратиться к Роману Петровичу - он сделает все возможное, чтобы помочь вам.
- приворот вуду москва
- сделать приворот москва
- магия приворот москва
- привороты гадалки в москве
- сильный приворот москва
Отзыв о привороте - кладбищенский приворот отзывы кто делал
(ScottpeR, 20. 2. 2024 9:42)
Приветствую всех!
Я хочу рассказать о своем опыте работы с магом. Отзыв о Романе Петровиче с сайта https://cmag666.ru только хороший.
Моя подруга обратилась к нему, когда столкнулась с проблемами в личной жизни. Роман Петрович предложил ей кладбищенский приворот на любовь для улучшения отношений с любимым человеком. Результаты превзошли все ожидания: уже через несколько дней отношения стали налаживаться, они стали более гармоничными и теплыми, чем были до того, как они поругались. Большое спасибо, Роману Петровичу, за его помощь и поддержку в такой трудной ситуации.
-кладбищенская магия последствия приворота отзывы
-отзывы о кладбищенском привороте
-кладбищенский приворот отзывы кто делал форум отзывы
-кладбищенские привороты отзывы кто
-кладбищенский приворот отзыв
Thi cong noi that
(Thomaswrics, 20. 2. 2024 7:48)Thi cong noi that cao cap sang trong, thi cong noi that biet thu, chung cu, van phong
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 | 29 | 30 | 31 | 32 | 33 | 34 | 35 | 36 | 37 | 38 | 39 | 40 | 41 | 42 | 43 | 44 | 45 | 46 | 47 | 48 | 49 | 50 | 51 | 52 | 53 | 54 | 55 | 56 | 57 | 58 | 59 | 60 | 61 | 62 | 63 | 64 | 65 | 66 | 67 | 68 | 69 | 70 | 71 | 72 | 73 | 74 | 75 | 76 | 77 | 78 | 79 | 80 | 81 | 82 | 83 | 84 | 85 | 86 | 87 | 88 | 89 | 90 | 91 | 92
not working
(FrbetPes, 23. 2. 2024 1:20)